研究人员选择了30例COPD急性加重期患者（平均年龄72岁）和24例健康体检者(对照组，平均69岁)，抽取受试者空腹肘静脉血10 ml,分离 培养外周血单个核细胞(PBMCs).将30例COPD患者的PBMCs均分为3份,分别根据不同的药物干预分为非干预组、罗格列酮干预组(罗格列酮组) 和罗格列酮联合GW9662干预组(联合干预组),对照组PBMCs不加任何药物干预.采用实时荧光定量PCR检测PBMCs中PPAR-γ和核因子 -κB的mRNA表达,细胞免疫荧光法结合激光扫描共聚焦显微镜检测PPAR-γ和核因子-κB蛋白表达及核转位,酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清液中 TNF-α含量.多组间比较采用方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验,相关性分析采用Pearson检验.
结果 信使核糖核酸(mRNA)(2-ΔΔCt值)和蛋白表达(荧光强度值):非干预组PPAR-γ(0.52和55)低于对照组(1和85),核因 子-κB(1.69和145)高于对照组(1和118)；罗格列酮组PPAR-γ(4.47和204)高于非干预组,核因子-κB(0.33和59)低于 非干预组；联合干预组PPAR-γ(2.25和142)低于罗格列酮组,高于非干预组,核因子-κB(0.64和90)高于罗格列酮组,低于非干预组；组 间比较差异均有统计学意义(均P＜0.01).TNF-α浓度(μg/L):非干预组(96.2)高于对照组(85.3),罗格列酮组(63.0)低于非 干预组,联合干预组(83.3)高于罗格列酮组,低于非干预组,组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).非干预组PPAR-γ蛋白主要位于细胞质,核 因子-kB蛋白主要位于细胞核；对照组PPAR-γ和核因子-κB蛋白在PBMCs细胞质和细胞核中均有表达；罗格列酮组PPAR-γ蛋白转位于细胞核, 核因子-kB蛋白转位于细胞质；联合干预组PPAR-γ蛋白转回细胞质,核因子-κB蛋白部分转移至细胞核.相关分析结果表明,PPAR-γ蛋白表达与核 因子-κB蛋白表达及TNF-α浓度均呈负相关(r值分别为-0.935和-0.924,均P＜0.01),核因子-κB蛋白表达与TNF-α的浓度呈正 相关(r=0.846,P＜0.01).
