天然药物或者是，在我国临床上有者广泛的应用。特别是一些民间的特效药用植物，发挥着甚至是西药无法比拟的功效。近年来，国家加大了中药的研究投入和研究力度，这正是我们中医药工作者的良好契机，弄清楚药效物质基础是中药现代化的根本。
目前，国内外研究天然药物或者是中药的单位与研究所不计其数。研究成果也很丰硕：研究论文数量和质量逐年增加，新药开发成果也明显增多。虽然研究手段日益先进，但绝大多数的实验室或课题组仍然以传统的色谱方法或是辅以现代分析手段来提取分离天然药物或者是中药中的化学成分。我想借这个话题，给大家一个平台：分享自己的实验心得体会，共同解决探讨天然药化实验中的难题，为弄清天然药物或中药的药效物质基础贡献自己的力量。下面，就我的实验体会谈一下我的想法。
1. 在从事研究之前一定要认真查阅与课题相关的文献资料。做到心中有数，即怎样来提取是最好的？怎样来解析植物中特征类型的化合物？别人都做了哪些方面的工作了？等等。象我的课题植物主要含有生物碱类成分，我就选择先用稀酸浸泡，再用阳离子交换树脂交换富集，就把叶绿素，多糖等杂质除掉了，同时生物碱含量也提高了，给后来的分离工作带来了很大的帮助。
2.天然药物或中药一定要在做之前确定其基原（植物来源）。这很重要，不然会给文献检索带来麻烦。
3.实验过程中要粗中有细，上大柱粗分时，合并流份时要粗，就是说TLC行为大体一致的流份都可以合并，这样可以避免一些重复的实验，不然分到的成分重复的厉害。但到了后来的细分时，就要小心合并每一瓶了，不然自己的辛勤劳动就会白费了。
4.要抓重点，学会放弃。因为我觉得一个植物中的化学成分成千上百。我们不可能把它全部拿到，所以我们实验中要拿那些量稍大的、容易拿的。不要上了很久的柱子，分到后面得到的量还不够打谱就不好了。你可以从最后结题剩下的几百个浸膏流份瓶子看到这一点。
5.实验过程中要小心每一步，三思而后行。因为你的浸膏来之不易。往往不再给你重来的机会。
6.要给自己信心，要敢于想，敢于尝试。
我觉得做科研，就是一个学会解决问题的过程。所以你在做每一件事情时都要想好思路，不能走一步，看一步，再想下一步。遇到问题要及时向有过该方面的师兄师姐或导师请教。
举一个小例子：我在实验中就发现，我们常用的凝胶色谱洗脱剂的选择问题，用单一的甲醇往往比氯仿－甲醇系统的分离效果要好（假如样品是溶于甲醇的）。我想是因为氯仿－甲醇系统在柱子中不完全混匀而引起溶解性能不一样，从而使色带不均一，导致了分离效果变差。这也许和凝胶的分离原理不相关（它是按分子大小来分离的），但实验中真的会出现这样的情况。所以，什么事情都只有亲身去经历了，才能发现问题，留下感受。
结合自己的实验谈下。D101大孔树脂的使用时应该注意的地方：1.新树脂的处理：可以用95%的乙醇加热回流，装好柱子以后再用95%的乙醇冲洗干净，最后用水冲洗至无醇味就可以了。2.样品上柱之前一定要澄清，不然就要过滤后再上样。假如你的样品不好溶于水，可以加少量的乙醇，但要注意控制好量。3.洗脱时，用水洗脱下来的东西也许会有很深的颜色，感觉可能会有东西。但这时绝对不能再把这部分上柱了，会堵柱子。这一点很重要。其余的和书上的差不多，按梯度冲就可以了。
[page]谈关于硅胶柱层析的看法：
1.柱子可以分为：加压，常压，减压，压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝结），以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必须同时使用水泵抽气。加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。压力的提供可以是压缩空气，双连球或者小气泵（给鱼缸供气的就行）。压力不可过大，不然溶剂走的太快就会减低分离效果。个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。
2. 装柱，柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂，会被淋洗剂带到产品中的，一般采用四氟节门的活塞。干法和湿法装柱觉得没什么区别，只要能把柱子装实就行。装完的柱子应该要适度的紧密（太密了淋洗剂走的太慢），一定要均匀（不然样品就会从一侧斜着下来）。书上写的都是不能见到气泡，我觉得在大多数情况下有些小气泡没太大的影响，一加压气泡就全下来了。当然如果你装的柱子总是有气泡就说明需要多练习了。但是柱子更忌讳的是开裂，无论竖的还是横的，都会影响分离效果。
3.加样，我们一般把样品完全溶解后，加1-2倍样品量的100-200目的硅胶拌样，完全挥干溶剂，再加入硅胶柱顶端，要敲平样品层，并且不能有气泡。
4.洗脱剂的选择。感觉上要使所需点在rf0.2～0.3左右的比较好（预制板）。不要认为在板上爬高了分的比较开，过柱子就用那种极性，如果rf在0.6，即使相差0.2也不容易在柱子上分开，因为柱子是一个多次爬板的状态，可以通过公式的比较：0.6/0.8一次的分离度，肯定不如（0.2/0.3）的三次方或四次方大。过柱子需要耐心，不要着急。摸好条件就慢慢冲。
